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| 品牌 | absin | 貨號 | abs50193 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 10mL | 供貨周期 | 一周 |
| 主要用途 | 細胞活性檢測 |
| 描述 | 細胞活力檢測有多種方法，如檢測染料排除的，檢測 ATP 產生的，檢測酶對底物降價活性的等。熒光素酶檢測法應用比較廣泛，是基于活細胞產生 ATP 的能力的。由于是細胞檢測，有時需要有內參對照，由此產生 multiplex 分析需求，即對同一多種分析方法同時檢測，相互不干擾，彼此檢測機理不同，如此可以進行相關對比，從而排除實驗因素外的數據差異。國外 CellTiter Fluor （CTF）類產品就是基于這樣的原理設計的。本公司自行研發推出了同類的熒光細胞活力檢測試劑盒（Fluorescent Cell Viability Assay Kit），性能上與國外品牌產品無明顯差異。本產品是基于細胞蛋白酶對多肽產物的降解，產生熒光信號。細胞膜完整性受損時，該蛋白酶就失去了對底物的降解活性。CTF-LTM與熒光素酶試劑盒檢測原理不同，檢測方法也不同，其檢測靈敏度次于熒光素酶法，但是可以檢測到更早期的輕微的細胞損害，兩個檢測相容性好，可以進行multiplex 檢測。 產品特性： 1、性能 檢測信號，Window，靈敏度與特異性與國外品牌同類產品類似。 2、相容性 與CTG等常用分析試劑相容，不形成相互影響。 3、特征 對細胞早期膜損傷更敏感。 4、便捷 “加入-混合—溫育-檢測"，整個實驗步驟簡單，易操作。 產品組成： 蛋白酶底物，緩沖液混合后灌裝于 10 mL 或 100 mL 的棕色瓶中及 2ml 管中，規格如下：
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| 使用方法 | 1、細胞準備： （1）在 96 孔或 384 孔細胞培養板鋪合適密度的待檢測細胞。建議使用白板。 （2）準備待檢化合物。將合適濃度的待檢測化合物加到細胞板孔中。培養液中有機溶劑濃度保持在1～2%以下。設立未加化合物的對照組。根據項目需求繼續培養合適的時間。 2、細胞活力檢測： （1）取出 CTF-LTM細胞活力檢測試劑，在室溫平衡 20 分鐘。輕搖混勻。 （2）配制 CTF 反應液：CTF 底物是 100x 的，用 CTF 緩沖液配成 1x 反應液，充分混勻，與待檢測細胞等體積混合使用。 （4）向培養板孔內加入等體積的 CTF 反應液，輕搖 20 秒鐘混勻，避光 37 ℃ 反應60～90 分鐘。 （5）在讀板儀上讀取熒光信號，激發波長 380nm，發射波長 510nm。 （6）根據需要，繼續進行下游的 multiplex 分析。 | |||||||||||||||
| 注意事項 | 1、試劑量：非經嚴格驗證，不建議隨意改變反應試劑用量。如使用 96 孔反應板，一般建議50uL培養液加等體積 CTF 反應液，后續檢測再加與 CTF 反應液等體積的 multiplex 檢測反應液（如CTG 反應液）。其它反應板作對應體積調節。建議將底物分裝，每次從底物stock 新鮮配制反應液。 2、必要時調整培養板反應孔內的實際剩余培養液體積，以保證 multiplex 分析總體積不超過200uL（96 孔板）或 40 uL（384 孔培養板）。 3、讀板時間：在加入試劑并于 37 ℃溫育 30 分鐘后，可以進行讀板，但是其檢測靈敏度低于37 ℃溫育 60 分鐘或 90 分鐘的結果。 | |||||||||||||||
| 基本信息 | ||||||||||||||||
| 儲存/保存方法 | -20℃及以下避光儲存，有效期12個月。 |
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